酵母表达系统
酵母蛋白表达服务简介
酵母表达系统，是工业微生物中应用较广泛的系统，遗传和生理背景清楚而且安全，结合了原核和高等真核表达系统的优点：生长快、培养成本低廉、操作简单并且蛋白翻译后能进行正确加工、修饰和折叠、表达的重组蛋白更加稳定、适于表达真核生物基因和制备有功能的蛋白质。
普健生物优势
1. 表达宿主包括酿酒酵母和毕赤酵母，蛋白表达成功率高。
2. 可提供多种酵母表达载体：有适用于分泌表达及胞内表达的营养缺陷型表达载体；有可以直接转化野生型毕赤酵母并且高效筛选表达菌株的载体等。
3. 丰富的酵母表达经验：可根据客户需求选择合适的载体，为客户进行整个表达体系的条件摸索及优化。
4. 高通量的酵母转化筛选平台，丰富的酵母蛋白表达经验：很多原核表达的分泌型蛋白会出现不溶或包涵体无活性情况，选择酵母表达系统则可避免这些问题，成功表达蛋白。
5. 大规模生产：可满足每批次1-4000 L的生产规模。
6. 一站式服务：基因设计及优化、蛋白表达条件优化、组成型表达菌株构建、蛋白纯化及后续加工处理、数据及报告整理。
服务内容
服务名称 | 服务内容 | 服务周期 | |
表达体系选择 | 表达载体：pPIC9k、pPIC3.5、pPICZαA、 pAO815、pGAPZα、pYES2/NTA 表达菌株：GS115、KM71、X33、INVSC1 | | |
表达载体构建 | 基因优化及设计，合成基因及亚克隆 | 2-4周 | |
表达及纯化测试 | 质粒线性化、转化、抗性平板筛选、PCR鉴定或梯度加压筛选、表达分析鉴定（SDS-PAGE and/or WB）、最优条件100mL扩大及纯化测试、标签去除测试（可选） | 3-6周 | |
1-10L表达及纯化 | 蛋白亲和纯化（或其他纯化方式）、蛋白buffer置换浓缩、SDS-PAGE/WB 鉴定纯化后蛋白、MS鉴定（可选）包涵体变复性（可选）、标签去除（可选） | 2-3周 | |
大规模发酵与纯化 | 蛋白亲和纯化（或其他纯化方式）、蛋白Buffer置换浓缩、SDS-PAGE/WB 鉴定纯化后蛋白、MS鉴定（可选） | 10-20L | 3-4周 |
20-50L | 4-5周 | ||
50L 以上 | 6-12周 | ||
服务套餐
基础套餐ata-1031：
针对一个质粒构建，测试20个阳性克隆，最佳克隆进行纯化测试。
增强套餐ata-1032：
针对一个质粒构建，测试20个阳性克隆后，挑选最佳2株克隆进行表达条件优化，最佳克隆及最佳表达条件进行纯化测试。
加压套餐ata-1033：
针对一个质粒构建，转化后抗生素加压筛选，挑选10株克隆进行表达条测试，挑选最佳2株克隆进行表达条件优化，最佳克隆及最佳表达条件进行纯化测试。
表达案例
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